(Flow cytometry, FCM) kay usa ka cell analyzer nga nagsukod sa fluorescence intensity sa stained cell marker. Kini usa ka high-tech nga teknolohiya nga naugmad base sa pag-analisar ug paghan-ay sa mga single cell. Kini dali nga makasukod ug makaklasipikar sa gidak-on, internal nga istruktura, DNA, RNA, mga protina, antigens ug uban pang pisikal o kemikal nga mga kabtangan sa mga selula, ug mahimong ibase sa pagkolekta niini nga mga klasipikasyon.
Ang flow cytometer nag-una naglangkob sa mosunod nga lima ka mga bahin:
1 Flow chamber ug fluidics system
2 Laser light source ug beam shaping system
3 Optical nga sistema
4 Electronics, storage, display ug analysis system
5 Sistema sa paghan-ay sa selula
Lakip kanila, ang laser excitation sa laser light source ug beam forming system mao ang nag-unang sukod sa fluorescence signal sa flow cytometry. Ang intensity sa excitation nga kahayag ug ang exposure time may kalabutan sa intensity sa fluorescence signal. Ang laser usa ka managsama nga tinubdan sa kahayag nga makahatag og single-wavelength, high-intensity, ug high-stability nga kahayag. Kini ang sulundon nga gigikanan sa kahayag sa pagpukaw aron matubag kini nga mga kinahanglanon.
Adunay duha ka cylindrical lens tali sa laser source ug sa flow chamber. Kini nga mga lente nagpunting sa usa ka laser beam nga adunay usa ka circular cross-section nga gipagawas gikan sa laser source ngadto sa usa ka elliptical beam nga adunay mas gamay nga cross-section (22 μm × 66 μm). Ang enerhiya sa laser sa sulod niini nga elliptical beam gipang-apod-apod sumala sa usa ka normal nga pag-apod-apod, nga nagsiguro sa makanunayon nga intensity sa kahayag alang sa mga selula nga moagi sa lugar nga nakit-an sa laser. Sa laing bahin, ang optical system naglangkob sa daghang mga set sa mga lente, pinhole, ug mga pagsala, nga halos mabahin sa duha ka grupo: upstream ug downstream sa flow chamber.
Ang optical system sa atubangan sa flow chamber naglangkob sa usa ka lens ug pinhole. Ang nag-unang function sa lens ug pinhole (kasagaran duha ka lente ug usa ka pinhole) mao ang pag-focus sa laser beam nga adunay circular cross-section nga gipagawas sa laser source ngadto sa usa ka elliptical beam nga adunay mas gamay nga cross-section. Nag-apod-apod kini sa enerhiya sa laser sumala sa usa ka normal nga pag-apod-apod, nagsiguro sa makanunayon nga intensity sa pag-iilaw alang sa mga cell sa tibuuk nga lugar nga nakit-an sa laser ug gipamubu ang interference gikan sa saag nga kahayag.
Adunay tulo ka nag-unang matang sa mga filter:
1: Long pass filter (LPF) - gitugotan lamang ang kahayag nga adunay mga wavelength nga mas taas kaysa usa ka piho nga kantidad nga moagi.
2: Short-pass filter (SPF) - gitugotan lamang ang kahayag nga adunay mga wavelength nga ubos sa usa ka piho nga kantidad nga moagi.
3: Bandpass filter (BPF) - nagtugot lamang sa kahayag sa usa ka piho nga wavelength range nga moagi.
Ang lain-laing mga kombinasyon sa mga filter makadirekta sa fluorescence signal sa lain-laing wavelengths ngadto sa indibidwal nga photomultiplier tubes (PMTs). Pananglitan, ang mga filter alang sa pag-detect sa green fluorescence (FITC) atubangan sa PMT mao ang LPF550 ug BPF525. Ang mga filter nga gigamit sa pag-detect sa orange-red fluorescence (PE) atubangan sa PMT mao ang LPF600 ug BPF575. Ang mga filter alang sa pag-ila sa pula nga fluorescence (CY5) sa atubangan sa PMT mao ang LPF650 ug BPF675.
Ang flow cytometry kasagarang gigamit alang sa paghan-ay sa selula. Uban sa pag-uswag sa teknolohiya sa kompyuter, ang pag-uswag sa immunology ug ang pag-imbento sa monoclonal antibody nga teknolohiya, ang mga aplikasyon niini sa biology, medisina, parmasya ug uban pang mga natad nahimong mas kaylap. Kini nga mga aplikasyon naglakip sa cell dynamics analysis, cell apoptosis, cell typing, tumor diagnosis, drug efficacy analysis, etc.
Oras sa pag-post: Sep-21-2023
